樣品飼料前處理：（稀釋倍數(shù)：20）

　　

　　1、稱1g飼料樣品，加入4ml甲醇；

　　

　　2、震蕩1min，加入0.1g氯化鈉；

　　

　　3、4000轉(zhuǎn)離心5min；

　　

　　4、取上清液0.2ml加入到0.8ml20mMPBS中，混勻。

　　

　　5、取150ul測定。

　　

　　檢測：

　　

　　1、先將三聚氰胺酶標(biāo)記物50ul，樣品150ul及標(biāo)準(zhǔn)150ul加入到已經(jīng)包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始反應(yīng)；

　　

　　2、在30分鐘的孵育過程中，樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標(biāo)記物競爭結(jié)合微孔中的三聚氰胺抗體；

　　

　　3、孵育30分鐘后用清洗液洗掉小孔中所有沒有結(jié)合的三聚氰胺及三聚氰胺酶標(biāo)記物。清洗四次后，放在桌上用吸水紙吸掉微孔板里多余的水份；

　　

　　4、清洗結(jié)束后，每孔中加入100ul清澈的底物溶液，結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的底物轉(zhuǎn)化為藍色的物質(zhì)；

　　

　　5、孵育30分鐘后加入100ul停止液STOP停止此反應(yīng)，根據(jù)各孔顏色深淺進行數(shù)據(jù)讀取。依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的顏色得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。

　　

　　正確的使用步驟是保證全自動酶標(biāo)儀正常工作的前提,希望廣大用戶在使用時能按照上面的步驟嚴(yán)格操作。